BASES BIOTECNOLÓGICAS Y ECOLÓGICAS PARA LA CONSERVACIÓN DE Ceratozamia mexicana Brongn.
Nadia Guadalupe Sánchez Coello, Instituto de Biotecnología y Ecología Aplicada. Circuito Los Lagos, Zona Universitaria. Tel. (+52) 228 842 2773. Apdo. Postal 250, CP. 91090, Xalapa, Veracruz. Correo-e:
sannadia@yahoo.com
COMITÉ TUTORIAL
Dra. Lourdes Georgina Iglesias Andréu
Dr. Mauricio Luna Rodríguez
Dra. Nancy Santana Buzzy
Dr. Lázaro Sánchez Velásquez
Dr. Mario S. Vásquez Torres
RESUMEN
Ceratozamia mexicana Brongn. (Zamiaceae), es una cícada endémica de la zona centro del Estado de Veracruz de gran valor como ornamental. Por la fragmentación y pérdida de hábitat que sufre la población, ésta se encuentra en la categoría de amenazada. Agrava esta situación el hecho de que como son plantas dioicas y de largo ciclo de vida, se requieren muchos años para reconocer por sus estructuras reproductivas los individuos machos y hembras. Actualmente no se cuenta con un método efectivo que permita la identificación temprana del sexo en esta especie, por lo que el presente trabajo tiene el fin de evaluar la potencialidad de la técnica de ISSR para identificar el sexo en plantas sexualmente indiferenciadas. Se utilizó el método de CTAB para efectuar la extracción de ADN a partir de tejido foliar. Se evaluó el rendimiento y calidad del ADN obtenido de 15 individuos y se formaron por el método masal segregante 6 mezclas de 5 individuos por cada sexo. Se establecieron las condiciones de amplificación más adecuadas para la detección de marcadores ISSR con seis iniciadores UBC (834, 841, 856, 890, 891 y 888). Los productos de PCR se separaron en geles de agarosa al 2% y se visualizaron con bromuro de etidio. Los resultados mostraron la utilidad del método de extracción de ADN de buena calidad y concentración, así como las condiciones de amplificación empleadas, como la temperatura de alineamiento para cada iniciador, permitieron obtener perfiles de bandas ISSRs, nítidas y reproducibles con un peso molecular que va desde los 400 a los 800 pb, donde además se pueden apreciar bandas que diferencian a machos de hembras, utilizando únicamente 25 pµ del oligonucleótido. Esta adecuación al método lo hace económicamente más accesible, al reducir sustancialmente la cantidad de iniciador y enzima que se requiere en la detección de estos marcadores. También se establecieron en la población de Ceratozamia mexicana, cuatro parcelas (5x5m²) a diferentes niveles altitudinales (1521, 1557, 1600 y 1650 msnm), para determinar la proporción de individuos hembras y machos que se encuentra en la misma y conocer si la altura influye en la expresión del sexo. Los resultados preliminares obtenidos revelaron la presencia de pocos individuos hembras en la población. La proporción detectada fue de 3:1 (machos y hembra, respectivamente). La mayor proporción de individuos machos se presentaron a una altura de 1600 msnm. Como Ceratozamia mexicana es una especie de muy largo ciclo de vida, se seguirán monitoreando las parcelas, para registrar el máximo número de individuos diferenciados y poder detectar con exactitud esta proporción.
